摘要:目的构建HCV core基因真核表达质粒,为进一步研究和解析HCV诱发人不死化肝细胞癌化的机制,HCV 感染的检测及疫苗和药物研发做好前期基础.方法将含HCV全长基因的pBRTM/HCV1-3011质粒于大肠杆菌JM109内扩增;提取pBRTM/HCV1-3011质粒;从pBRTM/HCV1-3011质粒中PCR扩增出HCV core片段并将其插入pGEM-T克隆载体;再与表达载体pcDNA3.1(-)重组,以得到重组的真核表达载体pcDNA3.1(-)/core;最后限制性酶切鉴定HCV core表达载体.结果从pBRTM/HCV1-3011质粒中扩增出的HCV core片段大小正确,经测序证明其碱基序列为编码目的基因的正确序列;凝胶电泳结果证明已将此片段克隆到pcDNA3.1/core内.结论成功的构建了HCV core基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)/core.
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