首页 期刊 赣南医学院学报 体外研究RNA干扰介导的SIAH2基因沉默对人肝癌细胞HepG2的影响 【正文】

体外研究RNA干扰介导的SIAH2基因沉默对人肝癌细胞HepG2的影响

作者:刘瑶; 贺兴波; 黄文峰; 周云; 黄才斌 赣南医学院第一附属医院消化内科; 江西赣州341000; 赣南医学院第一附属医院医务科; 江西赣州341000
肝癌细胞hepg2   siah2   小干扰rna  

摘要:目的:研究发现泛素连接酶SIAH2在多种肿瘤中高表达,为了研究SIAH2和肝癌发病之间的相关性,利用RNA干扰技术观察泛素连接酶SIAH2基因表达抑制对人肝癌细胞株HepG2细胞周期和凋亡的影响。方法:采用免疫组化检测50例HCC和相应癌旁组织中SIAH2蛋白的表达。构建特异性靶向SIAH2的重组干扰质粒转染人肝癌细胞HepG2,采用RT-PCR和Western blotting技术检测重组质粒对SIAH2 mRNA和蛋白表达的影响,MTS比色法测定重组质粒转染对细胞体外增殖能力的影响,流式细胞术检测重组质粒转染后细胞周期和凋亡的变化。Transwell实验检测细胞体外侵袭能力变化。结果:SIAH2在肝癌组织中表达明显升高。靶向SIAH2的干扰RNA能显著抑制SIAH2 mRNA和蛋白的表达水平;与HepG2-neo组、HepG2-NC组和未转染HepG2组相比,SIAH2干扰组(HepG2-S3)细胞增殖速度明显减慢,细胞明显阻滞于G1期,细胞凋亡率明显升高,体外侵袭能力减弱。结论:SIAH2通过促进肝癌细胞增殖和侵袭在肝癌发病中发挥癌基因作用,上述研究为以SIAH2为靶点的肝癌基因治疗提供实验依据。

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