首页 期刊 广东医科大学学报 富血小板血浆对三维培养中脐带间充质干细胞成骨分化的影响 【正文】

富血小板血浆对三维培养中脐带间充质干细胞成骨分化的影响

作者:胡资兵; 曾荣; 刘田丰; 刘志军 广东医科大学附属医院骨科; 广东湛江524001
脐带间充质干细胞   富含血小板血浆   乏血小板血浆凝胶   成骨分化  

摘要:目的探讨脐血来源的富血小板血浆(PRP)对三维培养体系中脐带间充质干细胞成骨分化的影响。方法收集足月健康剖宫产新生儿脐带标本,采用组织块培养法进行脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)的分离培养,观察细胞形态学特征;采用二次离心法提取脐血富血小板血浆和乏血小板血浆(PPP)。将PRP作为h UC-MSCs培养添加剂,PPP凝胶作为h UC-MSCs包埋载体。实验分为A组:10%FBS(对照组);B组:10%FBS+PRP;C组:10%FBS+PPP凝胶;D组:10%FBS+PPP凝胶+PRP。培养7 d后添加成骨诱导培养基,于第7、14天收集各组细胞上清液,比色法测定各组细胞上清液的碱性磷酸酶(ALP)活性。14 d后收集各组h UC-MSCs,RT-PCR测定各组h UC-MSCs成骨相关基因Runx2、ALP和Osteocalcin(OC)的相对表达量。结果经分离纯化的脐带间充质干细胞接种7 d后,各组细胞培养上清中ALP活性的差异无统计学意义;加入成骨诱导培养基7 d后,C、D组中ALP活性高于A、B组,D组高于C组(均P〈0.01)。与A组比较,C、D组中Runx2、ALP、OC基因表达均明显上调(P〈0.01),其中D组表达最高;B组中Runx2、ALP基因表达提高(P〈0.01),而OC基因表达差异无统计学意义(P〉0.05)。结论 PPP凝胶可作为体外培养h UC-MSCs的三维载体;PRP可提高h UC-MSCs成骨分化能力。

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