摘要：为了更好地将SRAP分子标记技术应用于葛根上,本研究采用正交设计对葛根的SRAP-PCR反应体系进行优化,并筛选适用于葛根的SRAP引物。结果表明,葛根SRAP-PCR反应最优体系为20μL:DNA40 ng,Mg2+浓度1.5 mmol/L,dNTPs浓度0.25 mmol/L,引物浓度0.6μmol/L,Taq DNA聚合酶0.5 U。各因素对葛根SRAP-PCR扩增效果影响大小依次为:dNTP>Taq DNA聚合酶>Mg2+>引物>DNA模板量。利用该最优体系筛选获得了91对可在葛根中扩增出清晰条带的引物组合。以3组引物组合对6个葛根材料进行PCR扩增,产物重复性好、稳定且具有多态性。本研究优化的葛根SRAP-PCR反应体系及筛选出的引物为葛根相关分子生物学研究提供了技术基础。

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