摘要：目的基于变性高效液相色谱技术,建立一种不需测序和杂交的新的mtDNA控制区多态性分析系统.方法 mtDNA控制区序列(包括HV Ⅰ,HVⅡ和HVⅢ)被分为4个扩增片段,采用配对分析突变检测模式进行DHPLC分析.对DHPLC检测条件(包括柱温和洗脱梯度等)进行优化.对100个不同类型差异序列的组合配对以检验该方法的检测效力.结果 10组序列相同的样本配对DHPLC图谱均只显示1个样品峰.对序列相差1个碱基～7个碱基、插入(/缺失)1个碱基、插入(/缺失)2个碱基等类型的90个扩增片段组合,用DHPLC进行分析,均得到≥2个样本峰的DHPLC图谱,序列差异检出率达100%.该技术可检测的异质性DNA成分的最小百分含量为10%.结论 DHPLC-mtDNA控制区多态性分析系统快速、经济和实用,在检测mtDNA异质性方面较直接测序更灵敏.

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