首页 期刊 福建林业科技 漾濞核桃RAPD反应优化体系的建立 【正文】

漾濞核桃RAPD反应优化体系的建立

作者:杨恩; 陈少瑜; 张雨; 范志远; 习学良 西南林学院资源学院; 云南; 昆明; 650024; 云南省林业科学院; 云南; 昆明; 650204
漾濞核桃   反应体系   扩增程序   品种鉴定  

摘要:以漾濞核桃中的大姚三台核桃为实验材料,通过对影响RAPD扩增结果的主要因子Tag酶、Mg+2、引物、模板DNA、dNTPs等不同的浓度和组合的试验研究,确定了漾濞核桃的最适反应体系和扩增程序,即在25μL反应体系中,0.75 u·L-1 Taq DNA聚合酶,3.0 mmol·L-1 Mg+2,0.3 mmol·L-1引物,含1.6 mg·L-1模板,2.5 ul 10×Buffer, dNTPs各0.2 mmol·L-1.扩增程序为:94℃预变性300 s,94℃变性40 s,36℃退火60 s,72℃链延伸120 s,45次循环后,72℃延伸600 s.

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