首页 期刊 动物医学进展 口蹄疫病毒VP1基因和免疫串联片段F的克隆及其在Vero细胞中的表达 【正文】

口蹄疫病毒VP1基因和免疫串联片段F的克隆及其在Vero细胞中的表达

作者:黄桂菊; 罗满林; 刘镇明; 贺东生; 耿忠海 华南农业大学兽医学院; 广东; 广州; 510642
vero细胞   vp1基因   口蹄疫病毒   片段   串联  

摘要:用RT-PCR方法扩增口蹄疫病毒VP1基因,并克隆到pgem-t easy 载体中,通过酶切、PCR和测序验证克隆正确,再亚克隆到真核表达载体pcDNA-3.1(+)上,得到重组质粒pcDNA-VP1.根据获得的口蹄疫病毒VP1基因的序列,结合相关的文献资料,设计合成免疫串联片段F,F含有VP1基因的主要抗原位点141位~160位及200位~213位的氨基酸序列,将F片段克隆到真核表达载体pcDNA-3.1(+)中,得到重组质粒pcDNA-F.在脂质体介导下,重组质粒pcDNA-VP1和pcDNA-F转染Vero细胞.间接免疫荧光分析表明VP1基因和F基因均在Vero细胞中成功进行了瞬时表达,为进一步研制FMD基因疫苗奠定了基础.

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