首页 期刊 当代化工研究 高山被孢霉△5脱饱和酶基因的分离与验证 【正文】

高山被孢霉△5脱饱和酶基因的分离与验证

高山被孢霉   酶基因   饱和   验证   分离  

摘要:原文节录:花生四烯酸(arachidonicacid)是人体的必需脂肪酸,具有独特的生物活性。A5脱饱和酶是花生四烯酸生物合成途径上的关键酶,以二高γ亚麻酸为底物,催化其第5位碳脱氢形成花生四烯酸。从花生四烯酸高产菌株高山被孢霉M6(Mortierellaalpina)中通过RTPCR分离了可能的编码△5脱饱和酶完整的cDNA,其大小为1366bp,编码446个氨基酸。推导出的蛋白质含有A5脂酰脱饱和酶中保守的特征性结构域,包括该蛋白质N端典型的细胞色素b5结构域,以及3个保守的组氨酸盒。为验证该蛋白质的功能,将该基因片段克隆到穿梭表达载体pPIC9K中,获得的重组载体pPIC9KD5通过电转化法转化到巴斯德毕赤酵母GS115中,

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