首页 期刊 草业学报 短柄草幼胚再生体系及农杆菌介导转化的初步研究 【正文】

短柄草幼胚再生体系及农杆菌介导转化的初步研究

作者:吴雪莉; 刘金星; Klaus; K; Nielsen; 杨志民; 高彩霞 南京农业大学园艺学院; 江苏南京210095; 中国科学院遗传与发育生物学研究所; 植物细胞与染色体工程国家重点实验室; 北京100101; Research; Division; DLF; TRIFOLIUM; A/S; 丹麦; 466060
二穗短柄草   幼胚   愈伤组织   农杆菌   遗传转化  

摘要:以二穗短柄草3个品系BDR018,BD21,BD21-3的幼胚为外植体,研究了幼胚大小对胚性愈伤组织诱导和再生的影响。采用携带gus和bar基因双元表达载体(pDM805)的根癌农杆菌菌株AGL1对BDR018品系的幼胚愈伤组织进行了遗传转化。本实验探讨了影响幼胚愈伤组织诱导再生及遗传转化的几个因素。结果发现,幼胚大小介于0.5~1.0mm之间的愈伤组织诱导率最高。随愈伤组织年龄的增加,BDR018,BD21,BD21-3愈伤组织的再生率下降,白化率上升。愈伤组织年龄在5~8周范围内转化效率较高,平均转化效率为38.5%。真空处理5min和0.01%的Silwet L-77处理均可提高转化效率。对转化植株进行GUS基因化学组织检测和PCR鉴定,初步证明外源基因已整合再生植株基因组中。

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