摘要:以云南41份野生猪屎豆属种质为材料,用ISSR进行分析,结果表明,100个ISSR引物中共筛选出16个多态性明显、反应稳定的引物,41份材料DNA共扩增出164条条带,平均每个引物的扩增条带数为10.3条,其中多态性条带总数为159条,多态性比率为99.3%。材料间遗传相似系数范围在0.4817~1.0000,表现出丰富的遗传多样性;通过正交设计优化,得出适合猪屎豆属野生植物的ISSR—PCR反应体系为:40ng模板DNA、引物0.2μmol/L、200/μmol/LdNTP、1×Buffer(Mg^2+plus)、0.5UTaq酶(TaKaRa);ISSR引物最佳退火温度为50或53℃;通过聚类分析,可将41份猪屎豆属种质分为5大类,同一种的种质可以很好的聚成一类;通过对思茅猪屎豆ISSR鉴定,得出它与猪屎豆属的遗传相似系数接近,然而确定该物种属于猪屎豆属需要做更多的鉴定。
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