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样本采集及寄送条件对苹果病毒RT-PCR检测效果的影响

作者:蒋东帅; 郗娜娜; 杨军玉; 崔利文; 王亚南; 曹克强 河北农业大学植物保护学院; 河北保定071001
苹果病毒   采集   保存   寄送方式  

摘要:为了解决采样季节、采样部位及寄送条件不规范影响苹果病毒样本检测可靠性的问题,以携带苹果锈果类病毒(Apple skin scar viroid,ASSVd)、苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leafspot virus,ACLSV)、苹果花叶病毒(Apple mosaic virus,ApMV)、苹果茎痘病毒(Apple stem pitting virus,ASPV)、苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)的苹果植株为试材,采用RT-PCR检测技术,研究了在不同月份采集果树不同组织部位,带毒样本在不同温度下保存不同时间,比较RT-PCR检测效果,以期为规范苹果病毒检测样本的采集、保存与寄送方式提供依据。结果表明:10月采样进行ASSVd、ACLSV、ApMV、ASPV RT-PCR检测,与其它时期相比检出率相对较高,以冠层下部1年生枝皮顶梢为材料对4种病毒进行RT-PCR检测,与其它组织部位相比检出率相对较高。4月采样,进行ASGV RT-PCR检测,检出率相对较高,冠层上部1年生枝皮顶梢较其它组织部位检出率高。1年生枝皮样本在4、25℃保存对RT-PCR检测影响相对较小,保存1 d和3 d,3棵树5种病毒的检测结果均为阳性,4℃条件下保存5 d,除ApMV,其它4种病毒3棵树检测结果均为阳性,保存7 d及以上多数病毒在测试温度下(0、4、25、37℃)检测结果为阴性。

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