摘要：目的 构建DDX46基因低表达慢病毒载体,并检测其在人膀胱癌细胞中的表达效果,为DDX46基因在人膀胱癌细胞中的研究奠定基础。方法 应用实时荧光定量检测5637细胞和T24细胞中DDX46 mRNA表达水平,以寻找合适的细胞系进行实验。分别以DDX46基因序列和普适型阴性序列为模板,设计合成靶点序列,并合成寡核苷酸双链,定向克隆到慢病毒质粒GV115,合成重组质粒shDDX46和shRNA,分别称之为实验组和对照组。将不同重组质粒与pHelper1.0和pHelper2.0分别转染293T细胞以包装成慢病毒颗粒后感染5637细胞和T24细胞。应用实时荧光PCR定量检测重组慢病毒感染5637细胞和T24细胞后DDX46 mRNA表达水平,判断其干扰效率。结果 5637细胞和T24细胞均高丰度表达DDX46 mRNA,其结果（用ΔCt值表示）分别为（6.53±0.08）和（8.48±0.11）;重组慢病毒感染膀胱癌细胞后,在5637细胞中,实验组DDX46 mRNA的表达水平（用ΔCt值表示）为（0.32±0.01）,低于对照组（1.00±0.10）,差异有统计学意义（P〈0.05）,其敲减效率为67.70%;在T24细胞中,实验组DDX46 mRNA的表达水平（用ΔCt值表示）为（0.11±0.01）,低于对照组（1.00±0.03）,差异有统计学意义（P〈0.05）,其敲减效率为89.00%。结论 成功构建DDX46基因低表达慢病毒载体,为研究DDX46基因在膀胱癌细胞中的作用奠定了基础。

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