作者:王鑫; 李智彤; 刘默芳 期刊:《生命科学》 2018年第02期
男性不育是一个全球性的人口与健康问题,主要病因是少弱畸形精子症或不明原因。最近的生殖生物学和临床医学研究发现了一系列与男性不育相关的基因突变和调控通路,促进了对男性不育致病原因及机理的认识。piRNA(piwi-interacting RNA)是2006年发现的一类动物生殖细胞特异性小分子非编码RNA,通过与Piwi家族蛋白结合形成Piwi/piRNA复合物,在沉默转座子、维持生殖细胞基因组稳定性和完整性、调控生殖细胞发育分化和配子形成等过程中...
作者:苟兰涛; 康俊炎; 刘默芳 期刊:《中国细胞生物学学报》 2017年第09期
大量遗传学研究表明,Piwi蛋白对于动物生殖系细胞发育具有至关重要的作用,Piwi基因敲除致动物不育。人Piwi(Hiwi)基因特异性地在雄性生殖细胞表达,但目前对其在人精子发生中的作用及其与男性不育的联系还知之甚少。该研究通过筛查临床男性不育样本发现,少弱精症患者Hiwi基因中存在拮抗泛素化修饰的D-box元件突变;通过构建基因敲入小鼠模型证实,该突变导致雄性不育。机制研究表明,小鼠Piwi(Miwi)D-box突变致MIWI蛋白异常稳定存...
作者:刘啸白; 马珺; 薛一雪; 刘丽波; 郑健; 李志清; 刘云会 期刊:《解剖科学进展》 2017年第04期
PIWI-interacting RNA(piRNA)是近年来新发现的一类小RNA分子,属于非编码RNA家族中的一员,通过结合argonaute蛋白的PIWI亚家族发挥作用。piRNA与生殖干细胞干性的维持、配子形成、胚胎发育等生殖事件和多种疾病的发生发展密切相关。PIWI/piRNA途径参与调控肿瘤的增殖、转移和侵袭,并与预后相关。本文着重介绍PIWI/piRNA的生物学功能以及在肿瘤中的研究进展。
作者:特日格勒; 付绍印; 李虎山; 王标; 何小龙; 祁云霞; 达赖; 刘永斌 期刊:《黑龙江畜牧兽医》 2017年第05期
为了研究PIWI基因对绵羊生殖细胞发育的影响,试验采用同源基因克隆的方法,以绵羊睾丸、卵巢RNA为模板,通过PCR扩增,半定量P1wI基因家族在苏尼特羊、小尾寒羊生殖腺的表达。结果表明:公羊PIWI蛋白家族3个成员mRNA的相对表达水平均极显著高于母羊(P〈0.01),PIWI1、PIW12、PIW14在高繁小尾寒羊母羊、低繁苏尼特母羊均只有微弱表达,同性别高繁小尾寒羊、低繁苏尼特羊mRNA相对表达水平差异不显著(P〉0.05)。
在原计划研究内容基础上,开展了piRNA、miRNA作用通路中功能蛋白质因子的筛选、功能机制研究。(1)对MIWI/piRNA机器的代谢分子机制和生理学意义进行了深入研究;(2)发现CAF1/MIWI/piRNA介导后期精子细胞中mRNA清除;(3)筛选获得了若干RISC相互作用蛋白,发现BTG2蛋白对miRNA引起的mRNA脱腺苷酸化具有显著促进作用,并且依赖于其与CAF1间的相互作用;(4)对2个与miRNA生物合成直接相关的关键蛋白质的类泛素化修饰(SUMOylation)进...
作者:刘静; 周志军; 常岩林 期刊:《生物技术通报》 2013年第02期
旨在进一步研究piwi基因在半变态昆虫干细胞自我更新和生殖系细胞发育中的作用。首先对实验室前期测定的优雅蝈螽(Gampsodeis gratiosa)转录组数据进行搜索,成功挑选出piwi基因的同源体,命名为giwi。通过设计特异性引物,采用巢式RT.PCR和RACE末端扩增技术克隆获得该基因cDNA序列。序列分析表明,优雅蝈螽giwi基因cDNA序列全长为3462bp,包含1个完整的开放阅读框2742bp,编码913个氨基酸,以及一个长度为111bp的5’端非编码区...
作者:黄文强; 邢万金 期刊:《中国生物化学与分子生物学报》 2009年第09期
非编码小RNA(non-codingRNA,ncRNA)主要有siRNA(smallinterferingRNA)、miRNA(microRNA)和piRNA(piwi-interactingRNA)三类,其中piRNA是近年来新发现的一类小RNA分子,特异性地同Argonuat蛋白家族中的Piwi亚家族蛋白结合,主要在生殖细胞系中表达,对维持生殖系DNA完整、抑制转座子转录、抑制翻译、参与异染色质的形成、执行表观遗传调控和生殖细胞发生等均有重要作用.piRNA基因几乎遍布于整个基因组,但呈高度不连续性分布,大...
作者:孙倩; 肖玲 期刊:《中国现代医学》 2013年第03期
目的探索Rh1药物对SKOV3细胞生长的影响,评价Rh1药物对细胞piwi基因家族的表达调控进行研究。方法 MTT分析Rh1对细胞生长的作用,realtime PCR和western blotting检测Rh1对piwi基因的表达影响。结果 Rh1能够明显抑制SKOV3细胞的增殖,10-6,10-8,10-10和10-12M的Rh1处理组均能够明显抑制SKOV3细胞活力。piwil-1,piwil-2,piwil-3和piwil-4的mRNA和蛋白在Rh1处理后均有不同程度的表达下调。结论 Rh1可抑制人卵巢癌细胞SKOV3细胞增殖并使...
作者:程子昊(综述) 尤永平(审校) 傅震(审校) 期刊:《医学研究生学报》 2008年第06期
PIWI家族成员包含保守的PAZ和PIWI区域,在干细胞自我更新、精子发生、RNA干扰和翻译调控中扮演重要角色。最近研究发现,一些PIWI在肿瘤中呈特异性表达,并与肿瘤的发生、发展相关。PIWI将有可能成为肿瘤诊断和预后判断的一个新的重要指标。研究PIWI表达调控机制,可探讨PIWI在肿瘤基因治疗方面的可行性。
作者:刘默芳 王恩多 期刊:《生命科学》 2008年第02期
小分子调控RNA,包括siRNA(small interfering RNA)、miRNA(microRNA)和piRNA(piwiinteracting RNA)、hsRNA(heterochromatin associatedsmall RNA)等,是当前生命科学研究的前沿热点。越来越多的证据表明,这些小分子RNA存在于几乎所有较高等的真核生物细胞中,对生物体具有非常重要的调控功能。它们通过各种序列特异性的RNA基因沉默作用,包括RNA干扰(RNAi)、翻译抑制、异染色质形成等,调控诸如生长发育、应激反应、...
作者:陈蓉 常国斌 张颖 陈国宏 胡国顺 栾德琴 刘艳 戴爱琴 期刊:《中国农业科学》 2011年第08期
【目的】目前,国内外尚无有关禽类piRNAs及其结合蛋白Piwi的研究报道,开展禽类小分子RNA及其结合蛋白的研究将为小分子RNA的遗传特性、发生和消失机理以及转基因鸡等研究提供基础依据。【方法】以鹌鹑为研究对象,通过构建cDNA文库和TA克隆测序的方法从睾丸组织中获得piRNAs序列和Piwil1基因的CDS序列,同时采用Q-PCR技术分析了鹌鹑不同生命阶段不同组织中piRNAs和Piwil1基因的表达规律。【结果】从鹌鹑睾丸组织中克隆了13个piRNAs序...
作者:肖俊 周毅 陈文治 钟欢 唐瞻杨 郭忠宝 罗永巨 甘西 期刊:《激光生物学报》 2014年第04期
Piwi基因是影响鱼类生殖细胞发育的重要因子。通过设计特异引物,以奥利亚罗非鱼的精巢RNA为模板,通过PCR扩增和克隆测序,获得了两种基因序列,分别长2 571 bp和3 204 bp。通过生物信息学分析,表明这两个片段与尼罗罗非鱼的Piwil-1和Piwil-2相似性都达到99%。通过翻译,Piwil-1和Piwil-2的蛋白序列具有典型的PAZ和Piwi结构域。因此,这两个基因为奥利亚罗非鱼的Piwil-1和Piwil-2基因。另外,生物信息学分析也表明Piwil-1和Piwil-2在一级...
piRNA是2006年发现的一类在动物生殖系特异性表达的小分子非编码RNA。piRNA的生成和功能行使均依赖PIWI蛋白。之前的研究认为,PIWI/piRNA通过表观遗传水平和转录后水平沉默转座子等自私性遗传元件,维持生殖细胞基因组的稳定性和完整性。最近的研究发现,PIWI/piRNA还可以通过转录后水平调控蛋白质编码基因,参与胚胎发育、性别决定、配子发育等事件的调控。现简要介绍PIWI/piRNA调控基因表达研究的新进展。