作者:郭倩倩; 王大涛; 孙红梅; 李春义 期刊:《特产研究》 2019年第04期
作者:鲍晨沂; 连雪; 杨莎莎; 张旭; JUNG; Yong-Sam; 钱莺娟 期刊:《畜牧与兽医》 2018年第05期
为研究马立克病病毒(Marek's disease virus,MDV)致瘤蛋白Meq对细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白p21表达的调节作用,采用RTPCR、Western blot方法检测Meq蛋白表达在鸡胚成纤维细胞(Chicken embryo fibroblasts,CEF)中对p21 mRNA和蛋白水平的影响。然后,构建p21启动子的荧光素酶报告载体,检测Meq蛋白对p21的启动子活性的影响。最后,分别用MDV Md5强毒株和CVI988/Rispens疫苗毒株感染CEF细胞,利用Western blot检测MDV感染后p21蛋...
作者:周滨; 梁传芳; 李景银; 崔瑞耀; 王豪夫 期刊:《中国病理生理》 2004年第11期
目的:探讨联合转染p21基因和反义c-fos核酸对兔自体移植静脉内膜增生的影响,探索一种理想的血管再狭窄的疗法.方法: 选择20只新西兰家兔,实验组、对照组各10只,均行自体颈外静脉、颈总动脉移植手术,实验组行腺病毒介导的p21c DNA溶液浸泡和反义c-fos寡聚核苷酸凝胶涂布;对照组仅行空载腺病毒溶液浸泡和凝胶涂布.术后2周取出移植血管,分别行病理学、免疫组织化学检测移植血管内膜厚度(IT)、内膜平滑肌细胞(VSMC)数及PCNA阳性表达情...
作者:刘英杰; 赵黔鲁; 马利杰; 王献华 期刊:《医学争鸣》 2005年第15期
目的:通过对星形细胞瘤组织中p21,VEGF,CD44s基因蛋白表达的检测,揭示脑胶质细胞瘤发生、发展、侵袭和播散的机制,为临床诊断、治疗及预后判断提供可靠的理论依据.方法:①实验组:分别在Ⅰ~Ⅳ级星形细胞瘤手术后存档蜡块中随机抽取40例,其中每一级各占10例.对照组:选取10例正常脑组织.②应用免疫组化技术(SP法)检测p21,VEGF,CD44s基因蛋白在星形细胞瘤组织中的表达.③统计学处理:采用SNK两两比较,p21经平方根反正弦变换后再进行成...
作者:李森茂; 胡嘏; 余虓; 王少刚; 叶章群 期刊:《现代泌尿生殖肿瘤》 2017年第05期
目的探讨微小核糖核酸miR-370-5p对前列腺癌细胞系PC3和DU145细胞增殖的影响。方法将前列腺癌细胞系PC3和DU145分为2组:阴性对照组-转染随机序列(dsControl);实验组-转染miR-370-5p或miR-370-5p+siP21。实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测各组细胞中p21mRNA的表达及前列腺癌细胞系中miR-370-5p的基础表达情况;蛋白质印迹法检测p21蛋白的表达;集落形成实验检测各组单个细胞克隆增殖情况;细胞增殖实验检测转染后各组细胞的增...
作者:刘洪伯; 陈茹; 马丽丽; 王海峰; 陈锐; 柳江 期刊:《中国临床药理学》 2019年第21期
作者:张晓兰; 李海萍; 金艳霞; 成华; 琪美格 期刊:《现代生物医学进展》 2018年第11期
目的:研究高海拔地区藏族妇女宫颈组织中P21Ser31Arg的多态性,并分析其与宫颈癌遗传易感性的相关性。方法:选择2015年7月~2016年6月收治的200例宫颈癌患者、100例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)患者、100例宫颈炎患者及100例正常宫颈患者为研究对象,采用限制性酶切片段长度多态性分析(PCR-RFLP)方法检测各组患者宫颈组织中P21Ser31Arg三种基因型Ser/Ser、Ser/Arg及Arg/Arg的分布情况并比较其构成差异,进一步分析其多态性与宫颈癌患...
作者:刘聪; 孙伟静; 李宁; 高佳琪; 于泽鹏; 敬舒; 王春梅; 孙靖辉; 陈建光; 李贺 期刊:《食品科学》 2018年第19期
目的:观察五味子乙素(schisandrin B,SCB)对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力的改善作用。方法:ICR小鼠随机分为4 组,即正常对照组(灌胃蒸馏水,皮下注射生理盐水)、衰老模型组(灌胃蒸馏水,皮下注射220 mg/kg D-半乳糖)、SCB(M)组(灌胃20 mg/kg SCB,皮下注射D-半乳糖220 mg/kg)、SCB(C)组(灌胃20 mg/kg SCB,皮下注射生理盐水),连续给药7 周。通过避暗实验及Morris水迷宫实验观察SCB对小鼠学习记忆能力的影响...
作者:王勇; 郭永连; 陈琳; 李国灏; 应诚诚; 程薇 期刊:《中国肿瘤生物治疗》 2018年第01期
目的:探讨人工合成小分子双链RNA-625(double-stranded RNA-625,ds P21-625)对前列腺癌细胞P21基因的激活作用及对细胞增殖的影响。方法:将人工合成的ds P21-625(ds P21-625组)和ds Ctrl质粒(ds Ctrl组)分别转染至前列腺癌细胞株PC-3和DU-145。用实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测转染后各组前列腺癌细胞中P21、细胞周期素E(Cyclin E)和细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)m RNA及蛋白的表达水平,流式细胞术、MTT...
作者:孙彦欣; 左玉柱; 李建辉; 范京惠 期刊:《畜牧与兽医》 2012年第04期
猪细小病毒与猪圆环病毒的混合感染较为普遍,给养猪业造成了较大的经济损失。从河北省部分地区病猪中分离猪细小病毒,通过PCR技术获得VP2蛋白的编码基因,采用PCR技术对猪圆环病毒的多肽尸21基因进行扩增。分别将其连入Simple-T载体中,经酶切、PCR及序列测定法进行鉴定。测序正确后,将VP2基因与多肽P21基因插入到pET-32a(+)载体中构建原核表达载体。将此重组质粒转化到大肠杆菌BL21感受态细胞中,并用IPTG诱导,诱导产物用S...
作者:曹岩; 黄颖; 郑永晨 期刊:《中国实验诊断学》 2006年第08期
目的 探讨转染p21^WAF1/GIP1基因(p21基因),对宫颈癌Hela细胞生长抑制作用及p21基因转染Hela细胞对顺铂敏感性的影响。方法 应用脂质体转染技术,将质粒peDNA3转入人宫颈癌Hela细胞中,经G418筛选,转染阳性克隆细胞连续传代培养,并采用中性红摄入法测定顺铂对p21基因转染人宫颈癌Hela细胞增殖抑制作用,流式细胞仪(FCM)检测细胞周期变化。结果 经G418筛选,Hela细胞全部死亡,转染质粒peDNA3的Hela细胞存活,并可连续传代...
作者:梅奇华; 杨鸿雁; 时黔宇; 李琼; 王卓; 赵鸿 期刊:《山东医药》 2017年第35期
作者:汪茜; 朱苹; 吴丽芳; 陈建武; 洪金省; 应学明; 赵建华 期刊:《现代肿瘤医学》 2017年第16期
目的:构建腺病毒rAd-CMV-E1A,将其作用于人鼻咽癌CNE-1细胞,验证目的基因E1A是否具有放射增敏作用及其作用机制.方法:使用“两步转化法”,完成质粒pAd-pShuttle-CMV-E1A的构建,将其包装成腺病毒rAd-CMV-E1A;以相同的方法构建腺病毒rAd-CMV.使用噬菌斑法测定滴度.将病毒作用于CNE-1细胞,使用RT-PCR、实时荧光定量PCR检测E1A、p53、p21基因表达情况;联合X射线照射细胞,采用MTT比色法、细胞克隆形成实验、Annexin V-FITC/PI双染检测...
作者:史怡雪; 李秦晋; 符文卉; 魏宝阳; 王智 期刊:《经济动物学报》 2016年第03期
采用RT-PCR和Western-blot方法分别检测蝎毒对Hela细胞p21基因的mRNA和蛋白表达,研究蝎毒抗癌作用的分子机理。结果表明:经不同质量浓度(50,100,200μg/mL)蝎毒处理的与未经蝎毒处理的Hela细胞p21基因在mRNA水平表达相近,而在蛋白表达水平上,经蝎毒处理的与未经蝎毒处理的细胞相比,p21基因表达均有明显增强,并以经100μg/mL蝎毒处理的Hela细胞p21基因的蛋白表达增强最为明显,由此证明蝎毒抑制Hela细胞增殖的机理可能是增...
作者:孙迎娟; 罗兵; 王云; 孙坚萍; 黄葆华 期刊:《肿瘤研究与临床》 2006年第02期
目的,探讨p53基因突变以及mdm2,p53和p21蛋白表达异常在EBV相关胃癌(EBVaGC)发生发展中的作用。方法应用免疫组化技术检测13例EBVaGC、45例临床病理资料与之匹配的EBV阴性胃癌(EBVnGC)组织中mdm2,p53和p21蛋白的表达;PCR—SSCP银染技术结合DNA序列分析检测p53基因exon 5-8突变;RT-PCR检测EBV相关基因的表达。结果EBVaGC组与EBVnGC组相比,两组间mdm2,p53和p21蛋白的阳性检出率差异无统计学意义(P=0.8300;P=0.7912;P...
作者:徐周敏; 梅琪; 陈坚; 杜佳; 魏燕; 徐迎春 期刊:《军事医学》 2007年第05期
目的:探讨组蛋白乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)对人肿瘤细胞的杀伤作用和机制。方法:选用3种人肿瘤细胞株,即白血病细胞株HL-60、非小细胞肺癌细胞株A549、乳癌细胞株MCF-7,采用MTT法检测TSA作用后肿瘤细胞的增殖状态;用流式细胞仪定量分析肿瘤细胞增殖周期的改变;用半定量RT-PCR法测定细胞周期相关基因p21的表达。结果:TSA能有效抑制肿瘤细胞的增殖,呈剂量依赖性;在接近各细胞IC50浓度的TSA作用下,可使肿瘤细胞主要阻滞在G...
作者:李鹂; 黄衡宇; 谢永芳 期刊:《吉首大学学报·自然科学版》 2006年第02期
以E9日龄至E14日龄昆明种正常小鼠胚胎为材料,利用质粒扩增的、地高辛标记的基因探针在组织切片上进行DNA-mRNA分子原位杂交,研究了p21基因在小鼠胚胎发育过程中的表达.结果表明:p21基因从E10日开始参与小鼠胚胎发育,其表达特异性随着胚胎发育进程逐渐增强,与它在细胞周期中的负调控作用相一致.p21基因表达强度较稳定,与其mRNA稳定有关.
作者:曹岩; 郑永洁; 郑永晨; 黄颖 期刊:《中国老年学》 2006年第09期
目的探讨p21基因转染人肝癌SMMC-7721细胞(7721细胞)对化疗药物的敏感性,深入研究p21基因对肝癌细胞的治疗作用。方法应用磷酸钙介导p21基因转染人肝癌7721细胞;通过G418筛选稳定表达细胞株并扩大培养;采用MTT法检测肿瘤细胞增殖速度;流式细胞术检测细胞周期变化。结果经过3~4w G418筛选得到稳定表达的细胞株,p21基因稳定转染并联合化疗药物应用可明显抑制7721细胞的体外增殖,细胞周期明显改变,细胞从G1期到G2期发生阻滞...
作者:倪冠英; 武宁; 郭海卓; 金顺子 期刊: 2011年第02期
目的探讨电离辐射对Jurkat细胞P21蛋白和ICR小鼠胸腺细胞p21基因表达的影响。方法采用流式细胞术(FCM),检测0、0.5、1.0、2.0、4.0及6.0GyX射线照射后Jurkat细胞中P21蛋白表达的变化。采用实时定量PCR技术,分别检测0、0.5、1.0、2.0、4.0及6.0GyX射线照射后4和24h小鼠胸腺及脾细胞中p21基因表达的变化。结果不同剂量x射线照射后12和24h,Jurkat细胞中P21蛋白表达在0.5-4.0Gy范围内均随剂量的增大而升高(t=-24.23~-3...
作者:杨慧敏; 黄林; 覃蒙斌; 钟月圆; 刘晓春; 杨小丽 期刊:《检验医学》 2012年第05期
目的探讨曲古抑菌素A(TSA)对鼻咽癌CNE2细胞凋亡的影响及作用机制。方法以不同浓度(300、400、500 nmol/L)TSA作用鼻咽癌CNE2细胞株,采用流式细胞术测定TSA作用前后鼻咽癌细胞凋亡情况;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析TSA作用后鼻咽癌细胞中细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制因子1A(P21)表达的变化。结果以300、400、500 nmol/L TSA分别诱导CNE2细胞凋亡,作用24 h后凋亡率分别为12.52%±1.57%、19.69%±3.00%、19.63%±2.68%;48 h...